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重组毛囊特异性表达载体的构建与验证

文献类型: 中文期刊

作者: 于永生 1 ; 罗晓彤 1 ; 朴庆林 1 ; 金海国 1 ;

作者机构: 1.吉林省农业科学院畜牧分院

关键词: 角蛋白关联蛋白6-1;毛囊特异表达载体;体外验证

期刊名称: 安徽农业科学

ISSN: 0517-6611

年卷期: 2011 年 39 卷 06 期

页码: 3615-3617

收录情况: 北大核心

摘要: [目的]构建毛囊特异性表达绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(KIF Ⅱ-9)cDNA的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性。[方法]根据绵羊毛角蛋白关联蛋白6-1(KAP6-1)基因已知DNA序列设计合成2个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到KAP6-15’调控序列,然后与毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因(KIFII-9)cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下注射该重组载体证明其表达有效性。[结果]PCR扩增出1042 bp的特异性片段,DNA测序结果证明,该克隆片段与KAP6-1 5’端调控区序列相比具有极高的一致性;构建的毛囊特异性表达载体PCDNA3.1-KK,皮下注射新生小鼠,皮肤内KIF Ⅱ-9得到转录。[结论]该试验构建的载体PCDNA3.1-KK具有表达特异性。

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