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O型口蹄疫病毒VP1蛋白的原核表达及功能鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 杨苏珍 1 ; 张改平 1 ; 鲍登克 1 ; 乔松林 1 ; 万博 1 ; 樊剑鸣 1 ; 职爱民 1 ; 李学伍 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院

关键词: 口蹄疫病毒;VP1基因;原核表达;蛋白复性

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2009 年 24 卷 06 期

页码: 15-18

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为获得具有免疫原性的FMDV VP1蛋白,以O型FMDV重组质粒PMD18T-VP1为模板,利用PCR技术扩增得到O型FMDVVP1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组表达载体,命名为pET-VP1,经PCR和测序鉴定后,用IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析。结果显示,在分子量约为45 ku处有1条明显的蛋白条带,且能被口蹄疫阳性血清识别,表达产物通过包涵体纯化后用透析法复性;ELISA检测结果显示,所复性的蛋白具有较高的活性。结果表明,FMDV VP1蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为开发诊断制剂和疫苗的研制打下基础。

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