文献类型： 中文期刊
作者： 张春莉 1 ; 施定基 2 ; 黄倢 3 ; 张海霞 1 ; 彭国宏 1 ;
作者机构： 1.中国科学院海洋研究所
2.中国科学院植物研究所
3.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词： 白斑综合症病毒(WSSV);囊膜蛋白;VP28蛋白;基因克隆;穿梭表达载体
期刊名称： 海洋科学
ISSN： 1000-3096
年卷期： 2003 年 27 卷 02 期
页码： 72-76
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 用蔗糖密度梯度离心法分离纯化白斑综合症病毒(WSSV)。设计并合成引物 ,提取WSSV中国株的基因组DNA作为模板 ,通过PCR ,扩增克隆出VP28基因 ,利用BamHI和EcoRI切点将VP28基因插入克隆载体 pUC19的多克隆位点上 ,得到VP28基因的重组克隆质粒,对其进行双向DNA测序。测序结果表明,该基因含有615个核苷酸 ,与GenBank中已有不同来源的WSSV的序列片段同源性为100 %。利用BamHI切点将VP28的基因插入到穿梭表达载体启动子PpsbA的下游 ,EcoRI酶切鉴定 ,得到正向连接的可在蓝藻表达的重组穿梭表达载体 ,命名为 pRL VP28。
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