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军曹鱼Igμ重链的全长克隆及在各组织中的定量分析

文献类型: 中文期刊

作者: 侯月娥 1 ; 冯娟 1 ; 郭志勋 1 ; 郭吉余 2 ; 徐力文 1 ; 苏友禄 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所

2.广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心

关键词: 军曹鱼;免疫球蛋白;IgM;cDNA全长;荧光定量PCR

期刊名称: 水产学报

ISSN: 1000-0615

年卷期: 2012 年 36 卷 06 期

页码: 41-51

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用同源克隆和RACE技术,克隆了军曹鱼Igμ重链的cDNA全序列,并通过荧光定量技术分析其在组织中的表达。军曹鱼Igμ的cDNA全长1933bp,3的非编码区域(UTR)为164bp,5UTR为26bp,开放阅读框为1743bp,编码580个氨基酸,分子量为64.831ku,理论等电点6.6。推测的军曹鱼Igμ全长氨基酸序列与已报道的鱼类的相似性最高为60%,最低为30%,同两栖类的相似度在30%~33%,同其他高等的动物相似度不足30%。较保守的CH4区和鱼类相似性在64%~71%,同其他生物的相似度仅为31%~33%,具有较强的物种特异性。军曹鱼Igμ中存在半胱氨酸和色氨酸的保守位点以及FR2骨架区的GKGLEW和在FR3的YYCAR保守序列。Igμ链基因在健康鱼体中除了肾以外在其它各组织中均有表达,在肠中的表达量最高。经鲨鱼弧菌刺激48、96、192h后,在采样的各个组织中均有表达,心脏、鳃、肠道在刺激后48h表达量明显增加,脾脏、胃和脑0h时的表达量较高,肝脏、头肾以及肾脏192h后表达较显著。从时间上看,黏膜免疫屏障最先抵御外来抗原,其后,依次是肝脏、肾、头肾产生免疫应答,说明系统免疫在长时间的抵御外来抗原时发挥着重要作用。

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