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印尼虎鱼RAD-seq数据中微卫星标记的初步筛选及特征分析

文献类型: 中文期刊

作者: 屈政委 1 ; 宋红梅 2 ; 汪学杰 2 ; 刘奕 2 ; 牟希东 2 ; 刘超 2 ; 胡隐昌 2 ;

作者机构: 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词: 印尼虎鱼(Datnioides pulcher);RAD-seq;微卫星

期刊名称: 淡水渔业

ISSN: 1000-6907

年卷期: 2019 年 49 卷 04 期

页码: 9-15

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用RAD-seq(Restriction-site associated DNA sequencing)对印尼虎鱼(Datnioides pulcher)进行简化基因组测序,获得13 308 806个高质量干净读长(HQ clean reads),利用SSR搜索软件在所得序列中共检测到26 359个SSR位点,由496种重复基序组成,主要分布在三、四、五碱基重复类型中,单碱基重复序列中最多的类型为A/T,二碱基重复序列中以AC/GT和AG/GT重复单元为主,三碱基重复序列中以AGG/CCT、AGC/CTG、AGG/CCT为优势类型;在数量上,二碱基重复类型SSR位点最多(19 492个),占总SSR位点的73.95%;除了单核苷酸类型外,SSR基序的重复次数主要集中在4-9之间,多态性SSR数目为2 783个。根据SSR位点两翼序列,利用Primer 5.0成功设计出20 066对SSR引物,引物设计成功率为76.13%,依据测序数据中的重复类型和重复数,随机选择100个二至五碱基重复类型SSR在6个虎鱼样本中验证其可用性和多态性,有73对引物通过扩增可获得有效目的片段,其中20个SSR验证为具有多态性。开发所得SSR序列可用于印尼虎鱼及其近缘物种遗传分析、遗传图谱构建以及分子标记辅助育种等工作,同时也证实了利用简化基因组测序技术开发SSR标记和发现样品间具有多态性的SSR标记的可能性。

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