文献类型： 中文期刊

作者： 肖小芳 ¹ ; 李胜杰 ² ; 刘青山 ¹ ; 杜金星 ² ; 雷彩霞 ² ; 朱涛 ² ; 田静 ² ; 宋红梅 ² ;

作者机构： 1.湖州师范学院生命科学学院

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词： 草鱼;cyp19a;dsRNA;性腺发育

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2025 年 32 卷 004 期

页码： 421-434

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究cyp19a基因在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺发育过程中的表达模式及其RNA干扰靶基因沉默后各性别相关基因的表达响应,本研究通过RACE技术克隆草鱼cyp19a基因全长cDNA序列,采用qRT-PCR技术检测cyp19a基因在草鱼发育不同时期性腺组织和成鱼各组织中的表达模式,合成cyp19a-dsRNA并对雌鱼进行RNA干扰实验,对照组雌鱼注射等量生理盐水,检测性腺组织中性别相关基因的表达量和血清性类固醇激素含量。结果显示,草鱼cyp19a的cDNA序列全长为2219bp,其中开放阅读框长1554bp,5?非编码区(UTR)48bp,3?UTR617bp,编码517个氨基酸。草鱼cyp19a基因在性腺中表达量最高,其次是肌肉、脑和心脏组织。不同发育时期的性腺组织中,cyp19a在卵巢中的表达水平均显著高于精巢(P<0.05),且在48月龄性成熟时期表达水平显著上升,表明该基因在草鱼卵巢的发育和成熟过程中起关键作用。按5μg/g注射cyp19a-dsRNA沉默干扰后5d,dsRNA注射组cyp19a表达量与对照组相比显著降低(P<0.05),靶基因沉默效率在1 d时为59.72%,之后逐步上升。与对照组相比, dsRNA注射组在1～3 d时foxl2a和foxl2b表达量显著上调(P<0.05), dmrt1表达量下调(P>0.05), amh表达量显著下调(P<0.05),并在干扰后4～5d时foxl2a、foxl2b、dmrt1和amh的表达量逐步恢复至接近对照组水平(P>0.05);此外,注射组血清中雌二醇(E2)含量显著下降(P<0.05),睾酮(T)含量显著上升(P<0.05)。综上,草鱼cyp19a为性腺型芳香化酶基因,在卵巢组织中表达量最高并在性成熟阶段表达水平显著上升,且可能通过负反馈调控foxl2a和foxl2b表达,正向调控dmrt1和amh表达量。研究结果表明, cyp19a基因在草鱼卵巢发育过程中发挥关键作用。