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StSRK2E-like基因的序列分析及表达载体构建

文献类型: 中文期刊

作者: 冯月娟 1 ; 李荣 1 ; 王芳 1 ;

作者机构: 1.青海大学农牧学院;青海大学农林科学院;青海大学西北马铃薯教育部工程研究中心;青海大学青藏高原生物技术教育部重点实验室;青海省农林科学院青海省马铃薯育种重点实验室

关键词: 马铃薯;StSRK2E-like;序列分析;干旱胁迫

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2022 年 01 期

页码: 124-132

收录情况: 北大核心

摘要: SnRK2作为脱落酸(abscisic acid, ABA)信号转导途径的关键因子,对应答非生物胁迫防御机制的形成具有重要作用。为验证马铃薯SnRK2s的功能,本试验以‘青薯9号’为材料,利用RT-PCR对SnRK2家族中的StSRK2E-like基因进行克隆。序列分析显示,该基因CDS序列为1 089 bp,编码蛋白全长为362 aa,相对分子质量为41.06 kD,脂溶指数为89.67,亲水指数为-0.321,为亲水性蛋白;进化分析显示该基因与番茄中同源基因的亲缘关系最近,相似性高达98.44%;该基因上游2 000 bp启动子序列中除了含有TATA-box和CAAT-box核心元件,还含有干旱相关元件(MBS)及激素响应元件(TCA-element, ABRE, TGA-element),推测该基因参与干旱和激素胁迫应答。用RT-qPCR定量检测不同干旱胁迫时间下马铃薯根、茎和叶中StSRK2E-like基因表达水平。结果显示:StSRK2E-like基因在胁迫处理下的表达量显著低于对照,该结果表示该基因对干旱胁迫敏感;且随胁迫时间增加,对照组茎和叶中StSRK2E-like基因的表达量下调显著,胁迫组叶中下调显著(P<0.05),推测该基因在马铃薯抵御干旱胁迫过程中扮演着重要角色。StSRK2E-like基因的具体功能需要进一步研究。本试验成功构建pJAM1502-StSRK2E-like表达载体,为后续进行StSRK2E-like基因的功能验证提供试验基础。

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