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Cry1B抗独特型单链抗体的定点突变及生物活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 仲建锋 1 ; 李兴奎 2 ; 徐重新 1 ; 张霄 1 ; 刘贤金 1 ;

作者机构: 1.江苏省食品质量安全重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地农业农村部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所

2.郑州职业技术学院

关键词: Cry1B;分子改造;定点突变;杀虫活性;表面等离子共振

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2021 年 010 期

页码: 186-195

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: Bt毒素的长期应用使其在害虫抗药性等方面存在生态风险,这一现状促使高特异活性和新功能Bt抗虫资源的积极开发。前期研究发现抗独特型单链抗体制备技术是开发新型杀虫蛋白的一个新途径。然而获得的Bt Cry1B抗独特型单链抗体C7与昆虫BBMV结合能力不高,需进一步改造提高。通过分子模拟技术对C7与稻纵卷叶螟BBMV上的受体氨肽酶N进行同源建模、分子对接,并预测C7与氨肽酶N结合区域的热点残基。利用C7的热点残基构建饱和突变抗体库,并采用固相筛选方法,得到突变体Y124G。BIAcore分析表明Y124G与BBMV的结合能力增加,生物测定发现对稻纵卷叶螟的杀虫活性提高。这为抗体分子改造技术的应用奠定了基础,也为新型生物农药创制提供了新的思路。

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