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南阳牛BoLA-DRA基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 楚秋霞 1 ; 徐照学 2 ; 施巧婷 2 ; 陆涛峰 2 ; 张彦明 1 ;

作者机构： 1.西北农林科技大学动物医学院

2.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 南阳牛;BoLA-DRA;pGEX-4T-1;原核表达

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2010 年 31 卷 06 期

页码： 9-14

收录情况： 北大核心

摘要： 为克隆南阳牛BoLA-DRA基因,构建原核表达载体并研究该基因在大肠埃希菌中的表达。从南阳牛脾脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到BoLA-DRA基因,将其克隆至pGEM-Teasy克隆载体上,转化感受态细胞DH5α,经测序鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建出重组表达质粒,经IPTG诱导表达。结果表明,本试验成功克隆了大小为917 bp的BoLA-DRA基因,重组质粒pGEX-4T-DRA在大肠埃希菌中以包涵体形式表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为54.4 ku,与预期结果一致。为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础。

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