文献类型： 中文期刊

作者： 张志浩 ¹ ; 鲁立刚 ² ; 张子敬 ¹ ; 王香南 ¹ ; 闵佳 ³ ; 韩艺伟 ¹ ; 彭晟坤 ¹ ; 栾曼茹 ¹ ; 刘奥兵 ¹ ; 施巧婷 ¹ ; 王二耀 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院畜牧研究所

2.毕节市农业科学院

3.河南农业大学

关键词： 夏南牛;外泌体;miRNA;胚胎发育;胚胎着床

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2025 年 52 卷 006 期

页码： 2691-2704

收录情况： 北大核心

摘要： 【目的】探索超数排卵后获取不同胚胎数量的牛子宫冲胚液外泌体miRNA的表达差异，以明确子宫冲胚液外泌体miRNA在牛胚胎发育和着床中的调控机制。【方法】选取15头3～6岁、480～600 kg夏南牛进行超数排卵、同期发情和人工授精。在人工授精后第7天，冲洗牛子宫以获取囊胚，根据国际胚胎生产的平均水平5.5枚作为标准，选取获取的囊胚数量多的3头夏南牛(试验组)和获取的囊胚数量少的2头夏南牛(对照组),收集子宫冲胚液进行外泌体分离与鉴定，并提取外泌体miRNA进行测序分析；对差异表达miRNA进行靶基因预测，并对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。随机选取4个miRNAs(bta-miR-2888、bta-miR-11987、bta-miR-2484、bta-miR-27a-3p)进行实时荧光定量PCR验证。【结果】5个样本的囊泡粒径为30～150 nm,符合外泌体的特征。共筛选到14个差异表达miRNAs,其中9个miRNAs表达上调，5个miRNAs表达下调。差异表达miRNAs共预测到8 703个靶基因。GO功能富集分析表明，靶基因主要富集在与发育过程调节、多细胞生物发育调控、调节运输、发育过程的正向调节、细胞连接等功能有关的条目。KEGG通路富集分析表明，显著富集的MAPK和Hedgehog信号通路等与胚胎发育和着床相关，提示子宫冲胚液外泌体可能参与调控胚胎发育和着床。4个miRNAs的实时荧光定量PCR结果与转录组测序结果相一致。【结论】本研究从夏南牛子宫冲胚液中分离得到了外泌体，丰富了外泌体研究的物种，为夏南牛后续外泌体研究提供了材料。共筛选出14个差异表达miRNAs,有8个miRNAs与胚胎发育和着床相关。子宫内外泌体中miRNA的变化可能影响牛胚胎发育和着床。