文献类型: 中文期刊
作者: 王宏俊 1 ; 安烨 1 ; 龚玉梅 1 ; 陈小玲 1 ; 张培君 1 ;
作者机构: 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
关键词: 副鸡禽杆菌;血凝素;原核表达
期刊名称: 生物技术通讯
ISSN: 1009-0002
年卷期: 2008 年 19 卷 02 期
页码: 232-235
摘要: 目的:克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌(Apg)的血凝素(HA)基因,鉴定该重组HA的生物学活性。方法:根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的HA基因序列,设计合成了1对特异性引物,克隆Apg HA基因;以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增ApgHA全长基因(1026bp),将其克隆到pET-32a(+)载体上,构建原核表达载体pET-HA,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化重组HA;通过Western印迹及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果:表达并纯化了Apg重组HA,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。结论:构建了Modesto株Apg HA基因的原核表达载体,并表达纯化了Apg HA融合蛋白,该重组HA具有凝集鸡红细胞的活性,为进一步研究Apg HA的免疫功能奠定了基础。
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