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谷子十里香抗锈抑制消减杂交文库构建及初步分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李志勇 1 ; 贾丽霞 2 ; 董立 1 ; 王楠 1 ; 白辉 1 ; 全建章 1 ; 刘磊 1 ; 董志平 1 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院

2.河北工程大学

关键词: 抑制消减杂交;谷锈;谷子;表达序列标签

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2014 年 29 卷 06 期

页码: 126-130

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了研究十里香抗锈分子机理及其调控机制。以谷子抗锈十里香接种12,24,48,72,96 h叶片为材料,利用抑制差减杂交技术,构建了谷锈菌诱导的SSH文库,筛选十里香接种与未接种锈菌差异表达的基因片段,通过GenBank进行同源比对,对差异表达基因进行功能注释,并利用荧光定量PCR技术对部分差异表达片段进行表达分析。随机挑取差减文库中阳性克隆测序,共获得368个EST序列,插入片段大小为200~750 bp,通过网上Gen Bank非冗余数据库比对分析,发现其中32个EST与抗病相关。对与抗病相关的EST分析,推测WRKY转录因子、MAPK信号途径、钙信号途径、谷胱甘肽-S-转移酶、细胞色素P450、病程相关蛋白等可能参与了十里香与谷锈菌非亲和互作。进一步利用荧光定量PCR技术对SSH文库中4个基因做了表达分析,结果表明这些基因均受锈菌诱导表达。通过构建十里香受锈菌诱导的SSH文库,初步明确了十里香参与抗锈相关的基因,为下步谷子抗锈分子育种奠定基础。

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