文献类型： 中文期刊

作者： 高斯 ¹ ; 赵萍 ¹ ; 刘晓雅 ¹ ; 方桂杰 ¹ ; 任红艳 ² ; 毕延震 ² ;

作者机构： 1.湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室

2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

关键词： 丝氨酸蛋白酶37;表达载体;异位表达;siRNA;共转染;干扰效率

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2025 年 35 卷 001 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]细胞水平靶向筛选出小鼠精子特异性PRSS37基因的最适siRNA序列。[方法]构建PRSS37过表达载体pcDNA3.1-Kozak-3×Flag-PRSS37,并将其转染至GC-2细胞，通过Western Blot检测PRSS37的异位表达。基于PRSS37序列设计并合成3对siRNA序列，将PRSS37过表达载体和siRNA共转染于GC-2细胞，实时荧光定量PCR检测siRNA对PRSS37干扰效率，筛选最有效的siRNA。[结果]PRSS37过表达载体在GC-2细胞中成功表达，与对照组相比，实验组中PRSS37蛋白表达显著升高；设计合成的3对siRNA均能有效干扰PRSS37的表达，与未干扰组相比差异显著(P<0.05),其中siRNA-1干扰效率最高，干扰效率约为63%。[结论]成功实现了PRSS37在GC-2细胞中的异位表达，并在细胞水平筛选出小鼠PRSS37最适siRNA序列。