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兔支气管败血波氏杆菌双夹心ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 熊富强 1 ; 王芳 1 ; 恽时锋 2 ; 林焱 3 ; 范志宇 1 ; 胡波 1 ; 赵宁 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.南京军区南京总医院比较医学科

3.南京农业大学动物医学院

关键词: 支气管败血波氏杆菌;免疫血清;单克隆抗体;双夹心ELISA

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2010 年 26 卷 01 期

页码: 120-125

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴定,并与PCR检测方法比较。结果表明,兔抗Bb IgG的最佳稀释度为1∶6 400,浓度为2.5 mg/L;单抗的最佳稀释度为1∶800,浓度为5.0 mg/L。特异性试验和重复性试验结果表明,该方法特异性强、重复性好,与兔常见病菌大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和产气荚膜梭菌均不发生反应,同时与PCR检测方法的符合率为100%。

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