文献类型： 中文期刊

作者： 陈芳 ¹ ; 刘惠莉 ² ; 孙红立 ¹ ; 曹祥荣 ³ ; 李震 ² ; 赵立平 ⁴ ;

作者机构： 1.上海市农业遗传育种重点实验室

2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

3.南京师范大学生命科学学院

4.上海交通大学生命科技学院

关键词： TGEV;PEDV;多重RT-PCR;检测

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2005 年 25 卷 01 期

页码： 9-12

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了检测、区分猪传染性胃肠炎 (TGE)和猪流行性腹泻 (PED) ,建立了同时检测这 2种疾病病原体的多重 PCR方法。参考 Gen Bank登录的 TGEV和 PEDV纤突蛋白 S基因序列 ,经 DNAsis 2 .0比较分析 ,分别筛选出 TGEV、PEDV S基因相对保守区。以 TGEV TH- 98株 (Gen Bank登陆号为 AF4 94 337)和 PEDV CV777株 (Gen Bank登陆号为 NC0 0 3436 )为参考模板 ,利用软件 Primer 3设计合成了 2对寡核苷酸引物 ,以 ST细胞培养的 TGEV和 PEDV毒株核酸为模板 ,利用所设计的 2对引物进行多重 RT- PCR扩增 ,结果同时得到与试验设计相符的 4 99bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带 ,而对其他 3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明 ,建立的多重 RT- PCR方法可检测出 10 pg TGEV RNA和 10 0 pg PEDV RNA。