文献类型： 中文期刊

作者： 秦艳红 ¹ ; 乔奇 ¹ ; 张德胜 ¹ ; 田雨婷 ¹ ; 王爽 ¹ ; 王永江 ¹ ; 张振臣 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院植物保护研究所河南省农作物病虫害防控重点实验室农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室

关键词： 甘薯褪绿矮化病毒;基因克隆;序列分析;外壳蛋白;原核表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2013 年 42 卷 06 期

页码： 85-87，120

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 克隆甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)外壳蛋白(CP)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行诱导表达。根据已报道的甘薯褪绿矮化病毒西非(WA)株系基因组核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法克隆了SPCSV四川分离物基因组RNA2上1 902bp大小的片段。序列分析表明,该片段包括部分p60基因序列、完整的p8基因和CP基因(major CP)序列及部分mCP基因(minor CP)序列。CP基因由774个核苷酸组成,编码257个氨基酸残基,与已发表的SPCSV WA株系Can181-9分离物相比,其核苷酸和氨基酸序列一致性分别为99.48%和99.22%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的融合蛋白分子量约为38kD,为SPCSV抗血清的制备及其血清学检测技术的建立奠定了基础。