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对虾白斑综合症病毒重组cDNA克隆的构建与分析

文献类型: 中文期刊

作者: 宋晓玲 1 ; 黄倢 1 ; Kathy F.LTang 2 ; 杨冰 1 ; Donald V.Lightner 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.美国亚利桑纳大学兽医与微生物系

关键词: 白斑综合症病毒;cDNA克隆;构建;分析

期刊名称: 水生生物学报

ISSN: 1000-3207

年卷期: 2002 年 26 卷 05 期

页码: 444-451

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 取经人工注射感染了对虾白斑综合症病毒 40— 45h的凡纳对虾鳃组织 ,分离mRNA ,以mRNA为模板合成双链cDNA ,并克隆于PUC质粒的NotI/SalI位点 ,构建了 1 0 0 0余株对虾感染后期鳃细胞的重组cDNA克隆。重组质粒经PCR鉴定插入片段 ,DNA斑点杂交分析目的片段 ,测定了 2 0株对虾白斑综合症病毒的重组cDNA克隆的末端DNA序列 ,并对其进行了包含存在的开放阅读框架、启动区上游序列、编码产物的特性等分析。结果显示 :PCR产物在0 3— 1 6kb之间 ;大于 1kb的克隆中有 31 8%的克隆为白斑综合症病毒的重组cDNA克隆。已测序的不包含同源序列的 1 3株克隆中含有 1 4个开放阅读框 ,其中 1 1个上游可检出启动子基序 ,4个可检出启动子调制元件。ORF转译产物的特性基序分析显示 :有 2个ORFs可检出锌指基序 ,3个ORFs可检出亮氨酸拉链基序 ,2个ORFs可检出NTP结合基序 ,未检出核定位信号基序。

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