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牛源大肠杆菌O157:H7的分离及毒力基因鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 丁浩 1 ; 苏战强 1 ; 夏利宁 1 ; 王雨朦 1 ; 王栋 1 ; 张瑾瑜 1 ; 张桃 1 ; 况玲 1 ; 姚刚 1 ;

作者机构: 1.新疆农业大学动物医学学院

关键词: 牛;肠出血性大肠杆菌O157:H7;毒力基因;致病性

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2012 年 32 卷 08 期

页码: 1148-1153

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157:H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小鼠明确分离株致病性。结果显示,成功分离到7株出血性大肠杆菌O157:H7,并且有1株迟缓性发酵山梨醇麦康凯培养基。毒力基因检测显示,其中6株毒力因子表型为stx1-stx2+eae+hlyA+tccp+,另有1株表现型为stx1+stx2+eae+hlyA+tccp+,各分离株tccp基因均为阳性,但携带的重复片段数量有差异。所采集样品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的检出率高达12%。1×1010 CFU同剂量口服接种经PBS洗涤的5株O157:H7分离株全菌,小鼠存活率有差异分别为40%,50%,60%,20%,50%,各分离株在小鼠体内排菌时间也有差异分别为攻毒后7,9,13,13,15d。

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