文献类型： 中文期刊
作者： 王涛 1 ; 夏党荣 1 ; 马勋 2 ; 薄新文 3 ; 王静梅 2 ;
作者机构： 1.石河子大学
2.石河子大学动物科技学院
3.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室
关键词： 扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa);无精症缺失(DAZ)基因;克隆;原核表达
期刊名称： 黑龙江畜牧兽医
ISSN： 1004-7034
年卷期： 2012 年 13 期
页码： 43-46
收录情况： 北大核心
摘要： 为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序列测定,构建重组质粒pET28a-DAZ,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;利用非变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析表达产物,通过螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明:重组DAZ基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白分子量约为14 ku。
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