文献类型： 中文期刊
作者： 赵宁 1 ; 王芳 1 ; 恽时锋 2 ; 范志宇 1 ; 胡波 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所
2.南京军区南京总医院比较医学科
关键词： 支气管败血波氏杆菌;坏死毒素;原核表达;免疫保护
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2011 年 33 卷 08 期
页码： 648-652
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 皮肤坏死毒素(DNT)是支气管败血波氏杆菌(Bb)的主要毒力因子之一。为研究DNT结合位点和催化位点的免疫保护性,本研究分别将其核苷酸序列N-端的1 612 bp片段(DNT1)和C-端的973 bp片段(DNT3)克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经IPTG诱导后在E.coli BL21(DE3)中获得表达。SDS-PAGE和western blot检测表明重组蛋白DNT1、DNT3均具有良好的反应原性。在主动免疫保护试验中,重组蛋白免疫组小鼠均能够产生较高的DNT抗体水平;当使用2 LD50的Bb强毒株BJL0504进行腹腔攻毒后,其存活率为100%,而阴性对照组则为40%;当使用1.07×108 cfu/mL Bb强毒株BJL0504进行滴鼻攻毒后第9 d时,重组蛋白免疫组小鼠已基本清除肺脏内的Bb菌,而阴性对照组小鼠肺脏内的Bb菌落数仍高达1.2×105 cfu/肺。本实验结果表明,DNT的结合位点和催化位点均具有良好的免疫保护性,有希望作为疫苗添加成分,为新型疫苗的研制提供实验依据。
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