文献类型： 中文期刊

作者： 彭元怀 ¹ ; 葛歆 ² ; 叶剑芝 ³ ; 金蓓 ¹ ; 韩志萍 ¹ ;

作者机构： 1.岭南师范学院食品科学与工程学院

2.岭南师范学院网络与信息服务中心

3.中国热带农业科学院农产品加工研究所

关键词： 桔黄赛多孢霉;弹性蛋白酶;蛋白结构;酶学特性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2023 年 009 期

页码： 3800-3813

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 外泌弹性蛋白酶是桔黄赛多孢霉（Scedosporiumaurantiacum）主要毒性蛋白酶之一，本文在前期研究的基础上，对这种蛋白酶的序列、结构和酶学特性进行了研究。首先通过柱层析技术将S.aurantiacum培养上清液中的蛋白进行了分离，然后通过酶谱电泳纯化得到了弹性蛋白酶条带。从凝胶中提取了弹性蛋白酶，通过质谱技术对其序列进行了检测，并对其反应特性、活力和反应动力学参数进行了研究。结果显示，S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对弹性蛋白和牛跟腱胶原蛋白（bovineachillestendoncollagen,BATC）具有较好的水解性能，对鱼皮胶原蛋白（fishskin collagen,FSC）的水解效率高于对鱼鳞明胶的水解效率，对酪蛋白的水解性最差。作用于弹性蛋白时，其催化效率小于猪胰腺弹性蛋白酶。Zn2+对酶活力有提升作用，而Ca2+、Mg2+、Na+、（2S）-2-[（4S）-2-氨基-1,4,5,6-四羟基4-嘧啶基]-N-[[[（1S）-1-羰基-3-甲基丁基]氨基]羰基]甘氨酰-N1-[（1S）-1-甲基-2-氧乙基]-L-谷氨酸甲酰胺（elastatinal）和苯甲基磺酰氟（phenylmethanesulfonyl fluoride,PMSF）均对酶活有抑制作用。该蛋白酶和青霉（Paecilomyceslilacinus）外泌丝氨酸蛋白酶（PDBEntry:c3f7oB＿）的序列最相似，且有多段保守序列的氨基酸个数多于7个，可以作为PCR反应引物设计的模板。酶学特性实验表明，S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对肺组织中的弹性蛋白具有降解作用，其蛋白表达和毒性机制需要进一步的研究。