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鹅圆环病毒TB Green实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 赵敏 1 ; 李家玉 1 ; 黄瑜 2 ; 万春和 2 ;

作者机构： 1.福建农林大学生命科学学院

2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室

关键词： 鹅圆环病毒;TB Green;实时荧光定量PCR方法

期刊名称： 福建畜牧兽医

ISSN： 1003-4331

年卷期： 2022 年 44 卷 004 期

页码： 26-30

摘要： 鹅圆环病毒主要感染宿主的淋巴细胞,导致其免疫功能下降,造成继发感染和共感染.为建立鹅圆环病毒分子检测方法,本研究根据NCBI数据库中GoCV基因特征,设计特异性引物,建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法.结果显示,建立检测GoCV的TB Green实时荧光定量PCR方法,灵敏度高,最低检测限为54.10拷贝/μL;特异性好,与水禽常见传染病病原均无交叉反应,扩增产物的熔解曲线仅GoCV出现1个特异性单峰,Tm值为(84.46±0.09)℃;重复性好,组内和组间重复试验变异系数分别为0.26%~0.55%和0.23%~0.87%.利用建立的TB Green实时荧光定量PCR方法和常规PCR方法同时对64份临床样品进行GoCV感染的检测,结果显示,常规PCR方法检出阳性样品15份,阳性率为23.44%;TB Green实时荧光定量PCR方法检出阳性样品18份,阳性率28.13%,且15份PCR阳性样品经TB Green实时荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%.本研究为后续开展GoCV感染的分子流行病学调查和致病机理研究提供技术支撑.

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