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二月兰SSR-PCR反应体系的优化及引物筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 贾新平 1 ; 孙晓波 1 ; 梁丽建 1 ; 苏家乐 1 ; 邓衍明 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院园艺研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室

关键词： 二月兰;SSR-PCR;反应体系;引物筛选

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2017 年 33 卷 05 期

页码： 40-46

摘要： 为建立适合二月兰的SSR-PCR反应体系,采用正交试验设计方法对影响二月兰SSR反应体系的5个因素(DNA模板、Mg~(2+)、d NTPs、引物和Taq聚合酶)进行优化试验,筛选出每个因素的最佳水平。结果表明,10μL反应体系中,Mg~(2+)浓度2.0 mmol/L,d NTPs浓度0.4 mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,DNA模板量20 ng,Taq聚合酶量0.6 U。以3份二月兰基因组DNA为模板,利用优化后的SSR-PCR反应体系进行引物筛选,从50对SSR引物中成功筛选出扩增条带清晰、具有多态性的引物有12对,证明该反应体系具有较好的稳定性和通用性。研究建立和优化的二月兰SSR-PCR反应体系,为进一步利用SSR标记技术开展二月兰分子生物学研究提供了理论依据和技术参考。

  • 相关文献

[1]绣球SSR-PCR反应体系的建立与优化. 贾新平,孙晓波,梁丽建,邓衍明,苏家乐,周建涛. 2016

[2]二月兰花瓣花色苷组成分析. 贾新平,邓衍明,孙晓波,梁丽建,肖政,刘晓青,苏家乐. 2018

[3]枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选. 顾林平,张冰,费艳,王化坤,王鹏凯. 2019

[4]一品红ISSR反应体系的建立与优化. 苏家乐,姜维华,冯立国,陶俊. 2009

[5]中国李简单重复序列(SSR)反应体系的建立. 乔玉山,章镇,沈志军,房经贵,郭洪. 2004

[6]狼尾蕨基因组DNA提取及SSR反应体系的建立. 贾新平,叶晓青,梁丽建,邓衍明,佘建明,孙晓波. 2013

[7]磷脂酰胆碱反应体系的建立. 卞欢. 2014

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