文献类型： 中文期刊
作者： 梁望旺 1 ; 周丹娜 1 ; 杨克礼 1 ; 刘泽文 1 ; 段正赢 1 ; 邓均华 1 ; 郭锐 1 ; 袁芳艳 1 ; 徐涤平 1 ; 田永祥 1 ;
作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 猪γ干扰素;克隆;原核表达
期刊名称： 湖北农业科学
ISSN： 0439-8114
年卷期： 2011 年 50 卷 11 期
页码： 2283-2286
收录情况： 北大核心
摘要： 利用RT-PCR技术从有丝分裂原刀豆素(ConA)诱导的长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出猪γ干扰素的成熟肽基因(mPoIFN-γ),并将其亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-mPoIFN-γ。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot检测,表明猪γ干扰素获得了高效表达,并具有免疫活性,表达产物约为20.5 kDa,主要以包涵体形式存在,产物经纯化、复性得到具有生物学活性的蛋白。利用细胞病变抑制法对其在H-PRRSV/Marc-145系统上进行抗病毒活性测定,结果表明其抗H-PRRSV活性为7.68×103 U/mg。为进一步研究猪γ干扰素功能奠定了基础和理论依据。
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