文献类型： 中文期刊

作者： 张雪寒 ¹ ; 何孔旺 ² ; 卢维彩 ² ; 赵攀登 ² ; 温立斌 ² ; 李彬 ² ; 郭容利 ² ; 王小敏 ² ; 倪艳秀 ² ; 周俊明 ² ; 俞正玉 ² ; 茅爱华 ² ; 吕立新 ² ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： EHECO157∶H7;转位紧密素受体;志贺毒素;融合基因;免疫原性

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2010 年 25 卷 04 期

页码： 180-185

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。