文献类型： 中文期刊
作者： 张敏 1 ; 白俊杰 1 ; 劳海华 1 ; 叶星 1 ; 简清 1 ; 罗建仁 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒;主要衣壳蛋白;原核表达;免疫印迹
期刊名称： 中国病毒学
ISSN： 1003-5125
年卷期： 2004 年 02 期
页码：
收录情况： CSCD
摘要： 根据鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus, ISKNV)主要衣壳蛋白(Major Capsid protein, MCP)基因(mcp)序列设计引物,PCR扩增得到一长约1400bp的DNA片段, 将其克隆到pGEM-T Easy Vector。氨基酸亲水性分析表明,在150-250位氨基酸之间亲水性很高,可构成主要抗原决定簇及形成跨膜区。mcp基因经PCR改造后克隆至原核表达载体pBV220,构建表达MCP的大肠杆菌基因工程菌,该工程菌经42℃诱导,SDS-PAGE检测,在约50kDa处有一特异蛋白带,含量约为菌体总蛋白的23%。用纯化和复性后的蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清,Western-blotting分析显示,重组MCP制备的抗血清能与ISKNV MCP特异结合,说明表达产物具有与ISKNV MCP相似的抗原特性。
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