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大口黑鲈MyD88基因的克隆及其对NF-κB的激活作用

文献类型: 中文期刊

作者: 高风英 1 ; 董浚键 2 ; 张赫桐 2 ; 李佳鑫 3 ; 朱芷琳 3 ; 孙成飞 2 ; 叶星 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所

3.天津农学院水产学院

关键词: 大口黑鲈;髓细胞分化因子88 (MyD88);克隆;表达分析;亚细胞定位;核因子κB (NF-κB)

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2025 年 33 卷 002 期

页码: 366-378

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 接头蛋白髓细胞分化因子88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)通常参与白介素-1受体(interleukin-1 receptor, IL-1R)和Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)介导的核因子κB (nuclear factor kappaB, NF-κB)激活,在先天免疫中发挥重要作用。在本研究中,克隆了大口黑鲈(Micropterus salmoides)MyD88的全长cDNA,包含一个867 bp的ORF,编码288个氨基酸残基的肽。大口黑鲈MyD88的推测蛋白具有N末端死亡结构域和C末端TIR (Toll-like/IL-1)结构域,已知这些结构域是哺乳动物MyD88的重要功能结构域。大口黑鲈MyD88蛋白与其他脊椎动物具有较高的同源性(58.5%~99.3%)。系统发育分析显示,大口黑鲈MyD88与其他鱼类MyD88聚为一支。MyD88 mRNA在健康大口黑鲈的所有被检测组织中均有表达,在肝脏中表达量最高。为了探索大口黑鲈MyD88的先天免疫作用,研究了其在肠、鳃、脾、肾中,对聚胞肌酸(polyinosinic-polycytidylic acid, PolyI:C)和诺卡氏菌(Nocardia seriolae)刺激的基因表达谱。结果显示,在所有4种检测的组织中,2种免疫刺激剂均上调了大口黑鲈MyD88转录水平,其中受诺卡氏菌的诱导最强。肾组织中,MyD88在感染后9 d出现了最大上调,感染组表达量为对照组的8.5倍(P<0.05);在鳃组织中PolyI:C诱导启动最早,刺激后8 h,在鳃组织中实验组相对表达量为对照组的5.6倍。大口黑鲈MyD88分布于HeLa细胞质中。大口黑鲈MyD88的过表达可以激活NF-κB。这些结果为阐明MyD88在大口鲈鱼先天免疫中的作用提供了基础数据。

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