文献类型： 中文期刊

作者： 祝永琴 ¹ ; 刘茂军 ¹ ; 冯志新 ¹ ; 魏建超 ² ; 曹瑞兵 ² ; 周斌 ² ; 陈溥言 ² ; 邵国青 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

关键词： 猪肺炎支原体;P36基因;毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2011 年 27 卷 02 期

页码： 307-312

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中猪肺炎支原体P36基因序列设计1对特异性引物,通过PCR扩增出猪肺炎支原体特异性蛋白基因P36,克隆入酵母表达载体pPICZα-A,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-P36。PICZα-A-P36经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌P36蛋白于发酵上清液中,通过SDS-PAGE电泳以及Western-blotting进行鉴定,结果表明,P36蛋白基因获得了分泌性表达,而且具有良好的反应原性,这为猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础。