文献类型： 中文期刊

作者： 董福双 ¹ ; 张艳敏 ¹ ; 杨帆 ¹ ; 梁新朝 ² ; 刘桂如 ² ; 王海波 ¹ ;

作者机构： 1.河北省农林科学院

2.河北农业大学

关键词： 小麦;芽生长点;基因枪;转化

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2009 年 24 卷 05 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了"用解剖刀去除种子根、用镊子把芽鞘掰去、用镊尖扫去包盖生长点的未展开叶、将带生长点的部分与胚乳分离"为特点的受体制备方法;确定1100 Psi+9 cm为最佳轰击参数组合。对轰击后的小麦芽生长点(70个×3批)进行gus基因瞬时表达检测,以受体数统计时,转化率为22.9%~35.7%;以生长点数统计时,转化率为5.7%~8.6%。用含badh/bar的pABH9质粒转化1000个受体,发育成了802个T0植株,对T0植株所结种子长成的穗行喷200 mg/kg的PPT进行抗性筛选,获得了105个抗性株,究其来源为42个T0株,由此计算抗性率为5.2%。用PCR检测T1植株,6个呈阳性。初步建立了基因枪法转化小麦种子芽生长点的技术。