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双重PCR检测马铃薯晚疫病菌和青枯病菌方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 陈庆河 1 ; 李本金 1 ; 兰成忠 1 ; 赵健 1 ; 邱荣洲 1 ; 翁启勇 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院植物保护研究所

关键词： 晚疫病菌;青枯病菌;双重PCR;分子检测

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2009 年 39 卷 06 期

页码： 578-583

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增马铃薯晚疫病菌转录间隔区并进行序列测定,通过序列比较,设计了1对马铃薯晚疫病菌的特异引物INF1/INF2,并对15种不同真菌、细菌和7种疫霉属和腐霉属卵菌基因组DNA进行PCR扩增,结果只有不同来源的马铃薯晚疫病菌株可获得324 bp的特异带。将引物INF1/INF2与卵菌通用引物进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达30 fg。运用设计的引物与马铃薯青枯病菌特异引物结合建立了双重PCR体系,能从马铃薯晚疫病菌和马铃薯青枯病菌总基因组DNA以及人工接种和自然发病的马铃薯植株中分别或同时扩增到324 bp和281 bp的特异片段。实现了同时对马铃薯晚疫病菌和马铃薯青枯病菌的快速可靠检测。

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