文献类型： 中文期刊

作者： 罗楚平 ¹ ; 刘永锋 ¹ ; 陈志谊 ¹ ; 王晓宇 ¹ ; 方先文 ² ; 陈忠明 ² ; 刘邮洲 ¹ ; 聂亚锋 ¹ ; 张荣胜 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

2.江苏省农业科学院粮食作物研究所

关键词： 水稻纹枯病菌;6-磷酸葡萄糖胺合成酶;活性物质;克隆表达

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2012 年 26 卷 02 期

页码： 137-143

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选新型水稻纹枯病菌GlmS活性抑制物质,采用3'RACE和5'RACE克隆了水稻纹枯病菌GlmS的基因组DNA序列和完整的cDNA序列。GlmS基因组DNA序列全长2 529 bp,含有8个内含子;GlmS cDNA序列全长2094 bp,推测编码一个含有697个氨基酸残基,分子量约为76.7 kD的蛋白质。生物信息学分析表明水稻纹枯病菌GlmS含有1个谷氨酰胺氨基转移酶结构域和2个葡萄糖异构酶结构域。采用大肠杆菌重组融合表达GlmS,重组蛋白的分子量经过葡聚糖凝胶层析和SDS-PAGE电泳测得分别为306 kD和77 kD,表明GlmS是由4个相同大小亚基组成的多聚酶复合体。重组蛋白的酶学性质研究表明其最适反应温度为37℃,最适pH为6.4,42℃下的半衰期为1 h,在pH 5.5～7.5时比较稳定。GlmS催化反应能被己糖胺通路末端产物鸟苷氮乙酰葡萄糖胺反馈抑制。