文献类型： 中文期刊

作者： 张译元 ¹ ; 郭延华 ¹ ; 王聪慧 ¹ ; 唐红 ¹ ; 南海艳 ¹ ; 王立民 ¹ ; 周平 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室;陕西西安市阎良区动物疾病预防控制中心

关键词： 绵羊;诱导性多能干细胞(iPSCs);重编程;转录组测序

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2018 年 55 卷 11 期

页码： 2142-2149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立绵羊(Ovis aries)诱导性多能干细胞系,为绵羊转基因育种、应用绵羊诱导性多能干细胞奠定基础。【方法】利用电转将OCT4、SOX2、KLF4、l-Myc、Lin28转染至绵羊成纤维细胞中并诱导培养至有光滑隆起、边缘整齐的细胞克隆,形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色以及实时荧光定量PCR检测克隆细胞的生物学特性;利用高通量测序技术对诱导0、10、20、30 d的阳性细胞的差异表达基因进行筛选。【结果】克隆细胞中SOX2、OCT4、SSEA-1蛋白免疫荧光染色均呈阳性; OCT4、SOX2、Nanog基因表达量均极显著高于成纤维细胞;0和30 d转录组测序表明,被注释到GO数据库的差异表达基因有9 465个,其中,上调基因6 987个,下调基因2 478个;KEGG分析共有5 773个基因注释到259个通路中,其中,P53信号通路显著富集,且其在干细胞增殖方面起着非常重要的作用。【结论】初步成功建立了绵羊诱导性多能干细胞。