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小麦种子高分子量谷蛋白亚基的高通量检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 张平平 1 ; 周淼平 1 ; 马鸿翔 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院江苏省农业生物学重点实验室江苏省现代作物生产协同创新中心

关键词： 小麦;高分子量谷蛋白亚基;高通量检测

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2015 年 13 卷 11 期

页码： 2593-2598

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立小麦种子高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)高通量检测方法,本研究改进了传统聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)中的样品制备和电泳分析方法,提高了检测效率。具体方法为:在小麦种子无胚端切取其体积的1/4~1/5,置于单孔容积为200μL的96孔PCR扩增板中,并在每个微孔中放入1粒直径2 mm的钢珠,并加入浸泡缓冲液静置1~2 h,再加入提取缓冲液,经高通量研磨器(Retsch Tissue Lyser)研磨后,在60℃的烘箱静置30 min。对微孔板离心和上清液预处理后在DYCZ-30C高通量垂直版电泳槽进行电泳分离,获得清晰的HMW-GS分离图谱。该方法简易、快速、成本低,适用于小麦标记辅助选择和资源评价中的大规模HMW-GS组成的检测。

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