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中国小麦花叶病毒(CWMV)外壳蛋白(CP)特异性抗体的制备与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 沈峥嵘 1 ; 戴远兴 2 ; 郭留明 2 ; 汪芷瑶 1 ; 张恒木 2 ;

作者机构： 1.浙江师范大学生命科学学院

2.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

关键词： 中国小麦花叶病毒;外壳蛋白;重组蛋白;多克隆抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2024 年 36 卷 009 期

页码： 2042-2050

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 中国小麦花叶病毒（CWMV）是浙江省农业科学院发现并鉴定的一种土传病毒，其RNA2编码的外壳蛋白（CP）在病毒侵染过程中发挥重要功能。为了检测该蛋白表达并分析其生物学功能，该研究采用RT-PCR方法从感染CWMV小麦病叶中扩增获得CP基因，并通过In-Fusion技术构建了CWMV CP重组表达载体，将其导入BL21（DE3）菌株诱导表达；原核表达的重组CP蛋白经镍柱亲和层析纯化后注射免疫家兔，收集抗血清经亲和层析纯化获得CP多克隆抗体。Dot-ELISA、ID-ELISA、Western blot显示，该抗体不仅对CWMV具有高度的特异性，而且其效价高达1∶2.048×10～7、灵敏度达6.25×10-2 ng。应用该抗体采用Dot-ELISA、Western blot方法检测田间小麦样品显示其可用于CWMV的准确诊断，这为CWMV病毒病检测、CP定量分析及其功能研究奠定了基础。

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