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水稻小热休克蛋白OsHSP20抗体特性鉴定及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 何婧 1 ; 刘寒 1 ; 郭留明 1 ; 李静 1 ; 张恒木 1 ;

作者机构： 1.浙江师范大学化学与生命科学学院;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/省部共建植物有害生物国家重点实验室培育基地

关键词： 小热休克蛋白;多克隆抗体;蛋白质印迹法

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2019 年 03 期

页码： 235-240

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】在前期克隆了一个水稻小热休克蛋白(OsHSP20)的基础上,进一步分析该蛋白多克隆抗体的免疫反应特性和应用范围,为深入鉴定该类基因的功能奠定基础。【方法】利用合成多肽和其原核表达产物分别免疫家兔制备了相应的多克隆抗体;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA用于分析比较多克隆抗体效价和灵敏度;Western blot用于鉴定多克隆抗体的特异性和应用范围。【结果】Western blot分析显示,利用重组OsHSP20蛋白及其合成多肽所制备的多克隆抗体均可以在原核表达OsSHSP样品中特异性检测到1条大小与预期一致(37kD)的条带,表明两种方法获得的多克隆抗体都具有高度的特异性;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA分析表明,利用重组蛋白制备的多克隆抗体效价和灵敏度均高于利用多肽制备的抗体。进一步的Westernblot分析显示该抗体可用于多种植物小热休克蛋白(SHSP)的检测。【结论】制备了OsHSP20蛋白质抗体,且具有高度的特异性和较高的效价和灵敏度,可广泛地用于多种单、双子叶植物HSP20蛋白的表达分析,有助于OsHSP20及其他植物同源蛋白的功能鉴定。

  • 相关文献

[1]一个水稻小热休克蛋白的异源表达及寡聚特性分析. 蔡年俊,郭留明,李静,项聪英,羊健,陈剑平,张恒木. 2017

[2]一个水稻小热休克蛋白基因的克隆和鉴定. 项聪英,蔡年俊,李静,羊健,陈剑平,张恒木. 2016

[3]一个植物半胱氨酸蛋白酶多克隆抗体的制备及其应用. 彭琪琪,羊健,廖乾生,张恒木. 2018

[4]浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备. 朱寅初,王宏宇,云涛,华炯钢,叶伟成,倪征,陈柳,张存. 2022

[5]中国小麦花叶病毒富含半胱氨酸蛋白多克隆抗体的制备与应用. 戴远兴,郭留明,何婧,沈峥嵘,耿艳飞,吕明芳,袁正杰,李静,张恒木. 2023

[6]鸡柔嫩艾美耳球虫2种假定致密颗粒蛋白基因的克隆与表达. 李天恩,周思含,孙洪超,付媛,石团员,闫文朝. 2024

[7]中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析. 张芬,蔡年俊,羊健,李静,陈剑平,张恒木. 2017

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