文献类型： 中文期刊

作者： 陈萌萌 ¹ ; 范志宇 ¹ ; 胡波 ¹ ; 宋艳华 ¹ ; 魏后军 ¹ ; 仇汝龙 ¹ ; 朱伟峰 ¹ ; 徐为中 ¹ ; 王芳 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 家兔;兔出血症病毒;IFN-β基因;启动子;荧光素酶;转录调控

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2019 年 23 期

页码： 78-81

摘要： 通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550 bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主IFN-β基因的转录调控机制提供了有效的工具。