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水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 欧阳元龙 1 ; 吴建祥 2 ; 熊如意 3 ; 周益军 3 ; 周雪平 2 ;

作者机构： 1.南京师范大学

2.浙江大学

3.江苏省农业科学院

关键词： 水稻黑条矮缩病病毒;原核表达;多克隆抗体;免疫捕获反转录聚合酶链式反应;斑点酶联免疫吸附测定

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2010 年 24 卷 01 期

页码： 25-30

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR方法从感染水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)水稻中克隆该病毒的外壳蛋白基因S10,然后将此外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体PET-32a中构建成重组原核表达载体pET32a-CP。将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni+ NTA亲和柱纯化获得分子量约为76kD含硫氧还蛋白的融合蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子制备RBSDV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了可靠、灵敏、特异的检测RBSDV的免疫捕获RT-PCR及Dot-blot ELISA方法,为该水稻病毒病的诊断提供技术支持。

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