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A型副鸡嗜血杆菌血凝素基因的克隆表达及其产物的生物学活性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王宏俊 1 ; 张培君 2 ; 龚玉梅 2 ; 李永清 2 ; 陈小玲 2 ; 杨汉春 1 ;

作者机构： 1.中国农业大学动物医学院

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 副鸡嗜血杆菌;血凝素基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 10 期

页码： 773-776

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录的A型Hpg Hp8株血凝素基因序列,设计合成了1对特异性引物,以Hpg Hp8株中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增了Hpg血凝素全长基因(1 035 bp),将其克隆到pET-32a(+)载体上,构建了原核表达载体pET-HA,表达并纯化了重组蛋白,通过免疫印迹及血凝和血凝抑制试验鉴定了该重组蛋白的生物学活性。结果显示,表达并纯化的HpgHA重组血凝素蛋白可以和A型Hpg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。表明,成功地构建了Hpg血凝素基因的原核表达载体,并表达、纯化了具有凝集鸡红细胞活性的Hpg-HA融合蛋白。

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