文献类型： 中文期刊
作者： 赵芳 1 ; 陈坤琳 1 ; 邢光东 1 ; 钱勇 1 ; 曹少先 1 ; 李隐侠 1 ; 孟春花 1 ; 张建丽 1 ; 张俊 1 ; 桂红兵 1 ; 仲跻峰 1 ; 王慧利 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所
关键词： 小鼠;胚胎干细胞;细胞外基质;克隆集落;多能性因子
期刊名称： 黑龙江动物繁殖
ISSN： 1005-2739
年卷期： 2020 年 005 期
页码： 1-7
摘要： 为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs(mESCs)自我更新及多能性维持的影响.结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状; Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长.MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢.免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著(P <0.05或P <0.01).说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异.
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