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抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制

文献类型： 中文期刊

作者： 王自良 1 ; 张改平 2 ; 张海棠 1 ; 杨艳艳 2 ; 王艳荣 1 ; 柴书军 2 ;

作者机构： 1.河南科技学院动物科学学院

2.河南省动物免疫学重点实验室

关键词： 苯巴比妥;杂交瘤细胞;单克隆抗体;ciELISA;快速检测试剂盒

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2006 年 14 卷 05 期

页码： 75-79

收录情况： CSCD

摘要： 用BSA-pAPB免疫Balb/c小鼠,用细胞融合技术制备并用间接ELISA和阻断ELISA筛选抗苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法生产PBmAb,应用PBmAb研制PB残留竞争ELISA(ciELISA)快速检测试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果表明,筛选出3株杂交瘤细胞,最好的3F6-C4株的PBmAb间接ELISA效价为1∶6.4×105,亲和常数(Ka)为1.96×1010L/moL,半数抑制浓度(IC50)为5.7μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)12.4%,与其它化合物无CR;PB-Kit的线性检测范围1.0～81μg/L,灵敏度0.75μg/L,检测限1μg/L;饲料样和猪尿样的平均添加回收率85.8%和91.3%,平均批内和批间变异系数均<15%。PB-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合PB残留快速检测的推广应用。

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