文献类型： 中文期刊
作者： 沈红保 1 ; 张建军 1 ; 张军燕 1 ; 李引娣 1 ; 陈媛媛 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院黄河水产研究所
关键词： 大鲵;虹彩病毒;PCR
期刊名称： 河北渔业
ISSN： 1004-6755
年卷期： 2012 年 08 期
页码： 17-19+67
摘要： 通过了解大鲵虹彩病毒(Giant salamander iridovirus,GSIV)在EPC细胞接毒情况和PCR的实际检测情况,为大鲵的病毒检测提供必要判断依据和检测方法。通过细胞接毒和组织分离分别提取病毒质粒,进行普通PCR扩增,电泳分析,比较病毒细胞培养和组织直接提取结果。Gsiv病毒体外培养:经传代48h的EPC细胞,25℃培养,12h后可观察到CPE出现,24h病变明显,CPE达15%,48h后CPE可达70%,72h后细胞完全脱落;PCR检测:对3个样本分别从组织提取和经细胞扩增分离的病毒进行普通PCR扩增检测,经细胞培养扩增的3个样本全部呈阳性;经组织提取的3个样本,2个呈阳性,一个呈阴性;电泳观察,病毒的扩增产物在500bp左右。在体外环境下GSIV是高病力的一种病毒,对EPC细胞在25℃时效应时间为3d,普通PCR经组织的检出率低,经细胞培养扩增可提高检出率但耗时久,不利于实际生产中快速、准确诊断疫情的需要。
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