文献类型： 中文期刊

作者： 盛蓉 ¹ ; 宋艳华 ¹ ; 胡波 ¹ ; 范志宇 ¹ ; 姜平 ² ; 薛家宾 ¹ ; 魏后军 ¹ ; 王芳 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院

2.南京农业大学

关键词： 兔出血症病毒;病毒样颗粒;口蹄疫病毒;B细胞表位;载体

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2015 年 30 卷 01 期

页码： 142-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究RHDV病毒样粒子作为载体提呈外源B细胞表位的能力,以兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60为载体,构建携带FMDV B细胞表位(FMDV VP1 B细胞表位200~213aa)的VP60嵌合蛋白,研究外源基因对VP60蛋白的表达、病毒样颗粒(VLPs)的装配及免疫原性的影响。分别在RHDV衣壳蛋白的C端、N端、306和307位氨基酸之间插入外源B细胞表位(FMDV VP1 B细胞表位200~213aa),得到嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统表达嵌合蛋白,分别命名为VP60-2F、VP60-306F和VP60-578F。经IFA、SDS-PAGE和Western Blot方法鉴定嵌合蛋白的表达,通过电镜观察嵌合蛋白自聚为病毒样颗粒的能力,通过动物试验研究其免疫原性。结果显示,嵌合VP60蛋白在杆状病毒表达系统中得到高效表达,可自聚形成病毒样颗粒,免疫小鼠后可以产生针对VP60和B细胞表位特异的免疫应答。该研究为嵌合VP60 VLPs的形成及结构功能的研究奠定基础,同时为RHDV-VLPs作为外源B细胞表位展示载体的可行性提供依据。