文献类型： 中文期刊

作者： 李雪峰 ¹ ; 康斌 ¹ ; 赵炳武 ¹ ; 武玉梅 ¹ ; 戴伶俐 ² ; 董鹏 ¹ ; 张建春 ³ ; 张春阳 ³ ; 斯琴高娃 ³ ;

作者机构： 1.金河佑本生物制品有限公司

2.内蒙古自治区农牧业科学院

3.杭州佑本动物疫苗有限公司

关键词： 实时荧光定量PCR;猪圆环病毒2型;灭活疫苗;Cap基因

期刊名称： 畜牧与饲料科学

ISSN： 1672-5190

年卷期： 2021 年 42 卷 001 期

页码： 8-13

摘要： 依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭活时间对检测结果的影响.结果显示:该方法只对猪圆环病毒2型基因有特异性扩增,其他3种对照病毒基因的扩增结果均为阴性;检测灵敏度达到102.0 TCID50/mL,比普通PCR方法高100倍;方法的重复性好,对同一样品进行10次检测,变异系数为2.28%;不同灭活剂用量和灭活时间对结果的影响较小,不会因各厂家使用的灭活剂用量和灭活时间不同,影响疫苗对比实验的公平性.该研究成功建立了一种评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,用于猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中病毒抗原含量的定量,其结果可以反映不同猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中抗原含量差异,为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗病毒抗原含量评估方法提供了新的思路.