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苯乙醇胺A人工抗原的制备与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 蔡齐超 1 ; 胡骁飞 1 ; 侯玉泽 2 ; 王耀 2 ; 段萌琪 1 ; 王方雨 1 ; 邓瑞广 1 ; 张改平 3 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室

2.河南科技大学食品与生物工程学院

3.河南农业大学牧医工程学院

关键词: 苯乙醇胺A;人工抗原;多抗血清;酶联免疫吸附法

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2014 年 43 卷 07 期

页码: 150-155

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为合成苯乙醇胺A人工抗原,并制备出鼠源苯乙醇胺A多抗血清,采用琥珀酸酐法改造苯乙醇胺A,应用活化脂法(DCC)和碳二亚胺法(EDC)与载体蛋白相连,合成人工免疫原苯乙醇胺A-BSA和检测原苯乙醇胺A-OVA,并用紫外扫描光谱法、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果显示,在紫外扫描光谱下,合成的免疫原在276nm处出现最大吸收峰;SDS-PAGE电泳发现,免疫原出现明显的拖尾现象;按10μg/只的剂量免疫小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫10d后,断尾采血,经测定,得到的多抗血清的效价均达到1∶10000,且1号小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为536.8ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于0.5%,具有很好的特异性。成功合成了苯乙醇胺A人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。

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