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魁蚶(Scapharca broughtonii)热休克蛋白90(HSP90)基因的克隆及转录表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 郑利兵 1 ; 刘志鸿 2 ; 吴彪 2 ; 周丽青 2 ; 孙秀俊 2 ; 杨爱国 2 ; 田吉腾 2 ; 董迎辉 3 ;

作者机构: 1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;厦门大学海洋与地球学院;海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室青岛海洋科学与技术国家实验室;浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室浙江万里学院

2.;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;厦门大学海洋与地球学院;海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室青岛海洋科学与技术国家实验室;浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室浙江万里学院

3.;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;厦门大学海洋与地球学院;海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室青岛海洋科学与技术国家实验室;浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室浙江万里学院;

关键词: 魁蚶;热休克蛋白90;基因表达;免疫反应

期刊名称: 海洋与湖沼

ISSN: 0029-814X

年卷期: 2018 年 01 期

页码: 124-133

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 热休克蛋白90(HSP90)作为一种研究的常规免疫基因,在许多物种都有过报道。本研究从构建的魁蚶转录组文库中筛选得到的HSP90基因部分序列为基础,通过RACE技术获得其c DNA全长序列(命名为Sb HSP90),以期明确魁蚶HSP90基因的结构特征、组织分布及其对病原菌刺激的免疫变化规律。序列和结构分析表明,该c DNA全长2707bp,编码一个由728个氨基酸组成的多肽,该多肽含有HSP90家族共有的5个签名序列,C端高度保守的MEEVD短肽序列和ATPase结构域;预测蛋白的分子量(Mw)为83.72k Da,理论等电点(p I)为4.85;预测该蛋白无信号肽,具有4个糖基化位点。同源性及系统分析表明,Sb HSP90基因与软体动物的HSP90相似性达到83%以上,其中与长牡蛎(Crassostrea gigas)和海湾扇贝(Argopecten irradians)相似度最高达86%,与甲壳动物HSP90的相似度都在81%左右,与脊椎动物HSP90-α和HSP90-β的同源性都很接近。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)结果表明:Sb HSP90 m RNA在魁蚶血细胞、斧足、鳃、外套膜、闭壳肌和肝胰腺和中均有表达,斧足中的表达量相对较高,而在肝胰腺中的表达量则相对较低;注射鳗弧菌后,相对于对照组,Sb HSP90基因在所检测的每个组织中m RNA水平上的表达量都显著上调(P<0.01),而且具有显著的时间依赖性和瞬时表达趋势。

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