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绵羊肺炎支原体内蒙古分离株DnaJ基因克隆表达及其免疫原性研究

文献类型: 中文期刊

作者: 戴伶俐 1 ; 王娜 1 ; 刘威 1 ; 白帆 1 ; 张帆 1 ; 张月梅 1 ; 宋越 1 ; 杨斌 1 ; 陈伟 1 ; 赵世华 1 ; 达来宝力格 1 ;

作者机构: 1.内蒙古自治区农牧业科学院

关键词: 绵羊肺炎支原体;DnaJ蛋白;序列分析;分子克隆;免疫原性

期刊名称: 畜牧与饲料科学

ISSN: 1672-5190

年卷期: 2022 年 01 期

页码: 1-7

摘要: [目的]克隆表达绵羊肺炎支原体DnaJ基因,研究其表达产物的免疫原性。[方法]以绵羊肺炎支原体内蒙古分离株NM03-MO株基因组DNA为模板,克隆其DnaJ基因序列,对蛋白质序列进行分析比对及三维结构预测;将该基因片段连接至pColdⅠ表达载体,构建pColdⅠ-DnaJ原核表达载体表达重组DnaJ蛋白并纯化,通过Western blot技术检测其与支原体抗体阳性血清的结合活性。[结果]NM03-MO株DnaJ蛋白序列与绵羊肺炎支原体序列同源性最高,但三维结构存在一定差异,重组DnaJ蛋白与绵羊肺炎支原体阳性血清有较好的结合活性,初步证明该蛋白具有免疫原性。[结论]绵羊肺炎支原体DnaJ蛋白被首次成功克隆表达,且具有较好的免疫原性,为后续分子致病机制研究及新型疫苗研制奠定基础。

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