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兔NF-κB p50蛋白质的原核表达及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 胡波 1 ; 魏后军 1 ; 范志宇 1 ; 仇汝龙 1 ; 宋艳华 1 ; 陈萌萌 1 ; 朱伟峰 1 ; 徐为中 1 ; 王芳 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

关键词: NF-κB;p50蛋白;原核表达;鉴定;兔

期刊名称: 江苏农业科学

ISSN: 1002-1302

年卷期: 2019 年 22 期

页码: 223-225

摘要: 为获得可溶性表达的兔NF-κB p50蛋白,本研究对兔p50基因进行大肠杆菌密码子优化及合成,并连接于原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌Origami B(DE3)菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-p50融合蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,GST-p50蛋白主要以可溶形式高效表达。经谷胱甘肽S转移酶(GST)磁珠纯化及蛋白免疫印迹(western blot)鉴定,所表达的GST-p50蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步开展兔NF-κB互作蛋白及信号通路的研究奠定了基础。

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