文献类型： 中文期刊
作者： 樊佳佳 1 ; 白俊杰 1 ; 马冬梅 1 ; 简清 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室
关键词： 唐鱼;实时荧光定量PCR;外源基因;拷贝数
期刊名称： 生物技术通讯
ISSN： 1009-0002
年卷期： 2011 年 22 卷 01 期
页码： 61-65
摘要： 目的:测定转红色荧光蛋白基因唐鱼的外源基因拷贝数。方法:以杂合F5代和杂合F6代转红色荧光蛋白基因唐鱼为材料,以其外源插入片段(pDsRed-mylz2)与基因组插入位点5′侧翼区之间的边界序列作为特异性内参片段,同时以外源整合的红色荧光表达载体序列(pDsRed-mylz2)作为目的基因,采用实时荧光定量PCR技术测定外源基因整合的拷贝数。结果:运用外源基因与特异内参在同批次实时荧光定量PCR中的初始拷贝数比值,得到杂合F5代和杂合F6代转红色荧光蛋白基因唐鱼中插入的外源红色荧光表达载体序列pDsRed-mylz2的拷贝数均值均为3。结论:转红色荧光蛋白基因唐鱼的外源基因拷贝数为3。
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