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利用CRIS PR/Cas9技术创制水稻中花11号dwarf1突变体

文献类型： 中文期刊

作者： 冯彦钊 1 ; 朱庆锋 1 ; 薛皦 1 ; 陈沛 1 ; 于洋 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院农业生物基因研究中心/广东省农作物种质资源保存与利用重点实验室

关键词： Gα亚基;水稻;中花11号;突变体;CRISPR-Cas9

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2022 年 49 卷 011 期

页码： 110-118

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]水稻异源三聚体G蛋白α 亚基在植物生长与逆境应答中具有重要的生物学功能,在水稻中花11号品种中创制Gα 蛋白编码基因DWARF1(D1)的突变体,为水稻功能基因组学研究提供材料.[方法]在中花11号的D1基因座位上设计靶向其外显子的sgRNA序列,构建CRISPR/Cas9载体,转化中花11号胚愈伤组织,经过抗性愈伤组织筛选和诱导分化后,对再生植株进行鉴定.[结果]筛选到3个含有不同编辑形式的d1突变株系,实时荧光定量PCR分析发现,D1 mRNA水平显著降低,表明无义突变介导的D1 mRNA降解过程亦被触发.在3个d1突变株中进一步鉴定到不含潮霉素抗性基因、不含载体骨架的植株,繁育后可以得到无转基因痕迹、稳定遗传的d1敲除植株.对d1突变株的生长、发育情况进行观察发现,中花11号背景下d1突变株显著变矮、穗明显变小,株高和穗长为中花11号野生型的50%~60%.种子变小及变圆,同时,种子长宽比和千粒重降低约40%.[结论]获得有效移码突变的中花11号背景d1突变株系,为进一步研究G蛋白及其相关基因的功能创制遗传材料.

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