文献类型: 中文期刊
作者: 李艳 1 ; 许为钢 2 ; 胡琳 2 ; 张磊 2 ; 齐学礼 2 ; 张庆琛 1 ; 王根松 2 ;
作者机构: 1.河南农业大学农学院
2.河南省农业科学院小麦研究中心
关键词: 小麦;玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC);高效表达载体;转基因;拷贝数
期刊名称: 麦类作物学报
ISSN: 1009-1041
年卷期: 2009 年 29 卷 05 期
页码: 7-12
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为获得具有C4光合特征的高光效转基因小麦材料,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受号为FJ415327)构建高效双元表达载体,通过基因枪介导法将其导入小麦品种(系)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因在转基因植株中的拷贝数。PCR和双酶切鉴定表明,玉米PEPCcDNA序列已插入双元表达载体pCAMBIA3301中,命名为p3301-pepc;对获得的抗性再生植株进行PCR扩增,其中有342株扩增出目的条带;在选取的15株转基因植株中7株拷贝数为1,3株拷贝数为2,2株拷贝数为3,拷贝数为5、8和17的分别为1株。初步证明玉米pepc基因已整合到小麦基因组中,且外源基因在转基因植株中既有单拷贝插入,也有多拷贝插入,这为进一步研究该基因在小麦基因组中的功能表达提供了试验材料。
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