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玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因高效表达载体构建及其导入小麦的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 李艳 1 ; 许为钢 2 ; 胡琳 2 ; 张磊 2 ; 齐学礼 2 ; 张庆琛 1 ; 王根松 2 ;

作者机构: 1.河南农业大学农学院

2.河南省农业科学院小麦研究中心

关键词: 小麦;玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC);高效表达载体;转基因;拷贝数

期刊名称: 麦类作物学报

ISSN: 1009-1041

年卷期: 2009 年 29 卷 05 期

页码: 7-12

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为获得具有C4光合特征的高光效转基因小麦材料,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因(pepc,GenBank接受号为FJ415327)构建高效双元表达载体,通过基因枪介导法将其导入小麦品种(系)中,利用Real-time PCR方法分析外源基因在转基因植株中的拷贝数。PCR和双酶切鉴定表明,玉米PEPCcDNA序列已插入双元表达载体pCAMBIA3301中,命名为p3301-pepc;对获得的抗性再生植株进行PCR扩增,其中有342株扩增出目的条带;在选取的15株转基因植株中7株拷贝数为1,3株拷贝数为2,2株拷贝数为3,拷贝数为5、8和17的分别为1株。初步证明玉米pepc基因已整合到小麦基因组中,且外源基因在转基因植株中既有单拷贝插入,也有多拷贝插入,这为进一步研究该基因在小麦基因组中的功能表达提供了试验材料。

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